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优秀征文汇编刊载系列一
 

地奥心血康对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的抗凋亡作用

秦江瑜,  康 毅, 刘 欣

天津医科大学

目的  研究传统中药成份地奥心血康(DAXXK)对大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的抗凋亡作用机制。 

方法 体外培养大鼠H9c2心肌细胞株,建立缺氧/复氧损伤模型,用地奥心血康进行干预;随机将细胞分为5组,正常对照组(C组);缺氧/复氧模型组(H / R组);缺氧/复氧模型+地奥心血康低、中、高浓度(10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L)干预组(H/R+L、H/R+M、H/R+H组)。采用PI染色法,用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;采用罗丹明123(Rh123)染色,用多功能标记仪检测线粒体膜电位(△Ψm)变化情况;采用ELISA法检测细胞内细胞色素C(Cyt-c)从线粒体往胞浆的释放情况;采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、caspase-9、caspase-3 mRNA的表达情况;采用 Western blot 法检测热休克蛋白70 (HSP70)的表达。 

结果  与缺氧/复氧模型组比较,地奥心血康用药组可明显降低大鼠H9c2细胞凋亡率(P<0.005),升高细胞线粒体膜电位(P<0.005)、减少细胞内Cyt-c从线粒体往胞浆的释放(P<0.005)、降低凋亡相关基因Bax、caspase-9、caspase-3 mRNA的表达(P<0.005)、而升高基因Bcl-2 mRNA的表达(P<0.005)以及上调HSP70蛋白的表达(P<0.005),且三个不同浓度药物组呈现出一定的浓度依赖趋势,高浓度组效果更明显。 

结论  本研究首次用大鼠H9c2心肌细胞证实,地奥心血康可通过调节线粒体凋亡通路中的多个环节,如保护线粒体膜电位、降低凋亡相关基因Bax表达、而升高基因Bcl-2的表达,从而减少线粒体内Cyt-c向胞浆的释放量,降低凋亡相关基因caspase-9、caspase-3的表达等,以及通过上调HSP70的表达,来发挥对缺氧/复氧损伤的大鼠H9c2心肌细胞的抗凋亡作用。

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